SAC-Ⅱb2小鼠腹水瘤細胞

SAC-Ⅱb2小鼠腹水瘤細胞是腫瘤生物學研究與藥物研發(fā)領域重要的小鼠腹水源性腫瘤模型，其穩(wěn)定的懸浮生長特性、高效增殖能力及典型的惡性腫瘤表型，為解析腹水瘤發(fā)病機制、評估藥物抗腫瘤活性及探索腫瘤微環(huán)境互作提供了關鍵實驗載體。該細胞系源自小鼠腹水瘤組織，通過體外分離純化與傳代篩選建立 —— 腹水瘤作為一類特殊的惡性腫瘤，細胞可脫離實體瘤結構，在腹腔液中懸浮增殖并誘導腹水形成，兼具實體瘤的惡性侵襲性與懸浮細胞的培養(yǎng)便利性。SAC-Ⅱb2 細胞保留了原代腹水瘤細胞的核心生物學屬性，既能在體外穩(wěn)定懸浮生長，又能在體內構建腹水瘤模型，成為連接體外細胞實驗與體內動物實驗的重要橋梁，尤其適用于腫瘤基礎研究與抗腫瘤藥物前期研發(fā)。

從生物學特性來看，SAC-Ⅱb2 細胞呈現(xiàn)典型的腹水瘤細胞形態(tài)與生長特征。在光學顯微鏡下觀察，細胞呈圓形或橢圓形，直徑約 12-16μm，胞質均勻透明，細胞核大而居中，核仁清晰可見，部分細胞存在雙核或多核現(xiàn)象，直觀體現(xiàn)惡性腫瘤細胞的核異型性；細胞無貼壁依賴，可在培養(yǎng)基中自由懸浮生長，且生長過程中僅形成松散小聚集體（直徑通常不超過 5 個細胞），便于后續(xù)細胞計數(shù)、藥物處理及分子檢測操作。在生長特性方面，該細胞最適培養(yǎng)條件為 37℃、5% CO?恒溫恒濕環(huán)境，pH 維持在 7.2-7.4 時增殖效lv最佳；其增殖能力突出，倍增時間約為 22-30 小時，對數(shù)生長期細胞密度可達 1.5×10?-2.5×10?個 /mL，細胞活力長期穩(wěn)定在 90% 以上，且傳代穩(wěn)定性強 —— 規(guī)范培養(yǎng)條件下，傳代 30 代仍能維持懸浮生長形態(tài)與惡性表型，不易出現(xiàn)貼壁轉化或增殖停滯。此外，SAC-Ⅱb2 細胞具備高效體內成瘤能力，將對數(shù)生長期細胞接種至同源小鼠腹腔后，7-10 天即可誘導形成明顯腹水，腹水中腫瘤細胞純度達 85% 以上，可直接分離用于原代細胞實驗或藥物體內療效驗證，這一特性使其成為體內外聯(lián)合研究的理想模型。

在培養(yǎng)操作與質量控制層面，SAC-Ⅱb2 細胞的培養(yǎng)體系與貼壁細胞差異顯著，需遵循專屬規(guī)范以確保細胞狀態(tài)穩(wěn)定。培養(yǎng)基選擇上，常規(guī)使用含 10%-15% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基（或 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基），血清需嚴格篩選 —— 需保證無支原體污染，且富含細胞生長所需的關鍵營養(yǎng)因子（如 IL-6、EGF、胰島素），這些因子不僅能促進細胞懸浮增殖，還能維持其惡性表型與體內成瘤能力；若需長期培養(yǎng)，可添加適量廣譜抗菌試劑（如青mei素 - 鏈mei素混合液）預防細菌污染，但濃度需控制在 100U/mL 以內，避免高濃度抗生素抑制細胞活力。培養(yǎng)操作時，采用搖瓶培養(yǎng)體系，搖床轉速控制在 80-100rpm，確保細胞均勻懸浮且獲得充足氧氣，避免因靜置導致細胞聚集成團或缺氧死亡；換液與傳代無需消化處理，直接收集細胞懸液，經 1000-1500rpm 低速離心 5 分鐘后，去除舊培養(yǎng)基，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞即可，操作流程較貼壁細胞更簡便高效。傳代時，按 1:3-1:5 的比例將對數(shù)生長期細胞接種至新?lián)u瓶，補充新鮮培養(yǎng)基至適宜體積（通常為搖瓶容積的 1/3-1/2），繼續(xù)培養(yǎng) 24-36 小時即可進入下一個生長周期。質量控制方面，需定期通過臺盼藍染色法檢測細胞活力（確保≥85%），通過形態(tài)學觀察確認細胞無異常變形（如胞體腫脹、核固縮）；通過 STR 分型鑒定確認細胞身份，排除與其他小鼠腹水瘤細胞系（如 SAC-ⅡC3、S180）交叉污染；若用于體內實驗，還需通過小鼠腹腔接種驗證成瘤能力，確保成瘤率達 95% 以上，避免因細胞特性改變影響實驗結果。

在科研應用領域，SAC-Ⅱb2 細胞憑借其獨特優(yōu)勢，在多個研究方向中發(fā)揮核心作用。在腫瘤生物學研究中，可用于腹水瘤發(fā)病機制探索 —— 例如研究腫瘤細胞分泌的 VEGF、MMPs 等因子對腹腔血管通透性的影響，解析腹水形成的分子機制；或通過 CRISPR-Cas9 技術敲除關鍵基因（如 p53、Myc、VEGF），觀察細胞增殖、凋亡及體內成瘤能力變化，明確基因在腹水瘤進展中的功能。在藥物研發(fā)方向，是抗腫瘤藥物體外篩選與活性評價的重要工具 —— 將候選藥物（如hua療藥物、靶向藥物、中藥活性成分）與細胞共培養(yǎng)后，通過 MTT 法、CCK-8 法檢測細胞活力，流式細胞術檢測凋亡率，克隆形成實驗評估增殖抑制效果，快速篩選活性化合物；結合體內腹水瘤模型，可進一步驗證藥物對腹水生成量、腫瘤細胞數(shù)量及小鼠生存期的影響，為藥物研發(fā)提供體內外雙重數(shù)據(jù)支撐。在腫瘤免疫研究中，可用于探索腫瘤微環(huán)境與免疫細胞互作 —— 分離腹水中的巨噬細胞、T 細胞等免疫細胞，研究其對 SAC-Ⅱb2 細胞的殺傷活性，或評估免疫檢查點抑制劑（如 PD-1/PD-L1 抗體）對腹水瘤的治療效果，為免yi治療策略優(yōu)化提供實驗依據(jù)。此外，還可用于腫瘤標志物篩選，通過轉錄組學、蛋白質組學技術分析細胞分泌組或基因表達譜，尋找腹水瘤早期診斷或預后評估的潛在標志物。

不過，使用 SAC-Ⅱb2 細胞需注意局限性。該細胞系源自小鼠，基因背景與人類腹水瘤（如卵巢癌、胃癌腹腔轉移形成的腹水）存在差異，因此在研究人類腹水瘤機制或篩選人類抗腫瘤藥物時，結果需謹慎外推，需搭配人類腹水瘤細胞系（如 SKOV3、MKN45）對比驗證。體外培養(yǎng)環(huán)境缺乏體內腹腔微環(huán)境的復雜性（如間質細胞、細胞外基質、免疫抑制因子），可能導致細胞生物學行為與體內狀態(tài)存在偏差，例如體外培養(yǎng)細胞可能丟失部分與腹腔定植相關的基因表達。同時，長期傳代可能出現(xiàn)遺傳漂變，需定期凍存早期傳代細胞（如 P5、P10 代），確保實驗過程中細胞遺傳背景穩(wěn)定，避免因細胞變異影響實驗重復性。