TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞

TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞作為研究哺乳動(dòng)物生殖生理與病理機(jī)制的重要體外模型，自建立以來便在生殖生物學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)及毒理學(xué)等領(lǐng)域占據(jù)關(guān)鍵地位。其來源可追溯至 11-13 天齡的正常小鼠睪丸組織，經(jīng)科研人員通過酶解分離、原代培養(yǎng)及純化篩選后，成功獲得生物學(xué)特性穩(wěn)定的細(xì)胞系。該細(xì)胞系完整保留了體內(nèi) Sertoli 細(xì)胞的核心功能特征，成為全球科研機(jī)構(gòu)探究睪丸生殖微環(huán)境調(diào)控、精子發(fā)生機(jī)制及生殖毒性評(píng)估的核心實(shí)驗(yàn)工具。

從生物學(xué)特性來看，TM4 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的梭形或不規(guī)則多邊形形態(tài)，在顯微鏡下觀察，細(xì)胞胞體舒展、胞質(zhì)均勻，細(xì)胞核呈橢圓形且位于細(xì)胞中央，核仁清晰可見。作為睪丸生精小管中的支持細(xì)胞，其最xian著的功能特征是能夠分泌多種生物活性物質(zhì)，例如轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素樣生長因子 - 1（IGF-1）及促卵泡生成素（FSH）受體等，這些物質(zhì)不僅為精子發(fā)生提供必要的營養(yǎng)支持，還能參與調(diào)節(jié)生精細(xì)胞的增殖、分化與成熟過程。此外，TM4 細(xì)胞還具備形成緊密連接的能力，可模擬體內(nèi)血 - 睪屏障的結(jié)構(gòu)與功能，為研究生殖細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境屏障機(jī)制提供了理想的體外實(shí)驗(yàn)體系。在增殖特性上，該細(xì)胞生長周期穩(wěn)定，倍增時(shí)間約為 24-36 小時(shí)，在適宜培養(yǎng)條件下可長期傳代且保持功能穩(wěn)定，便于科研人員開展長期動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)觀察。

在細(xì)胞培養(yǎng)操作方面，TM4 細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)環(huán)境有著明確的要求，需嚴(yán)格控制培養(yǎng)條件以維持其生理功能。適宜的培養(yǎng)溫度為 37℃，且需置于含 5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中，確保培養(yǎng)基 pH 值穩(wěn)定在 7.2-7.4 之間，為細(xì)胞代謝提供適宜的酸堿環(huán)境。培養(yǎng)基通常選用 DMEM/F12（1:1）混合培養(yǎng)基，同時(shí)添加 10% 的胎牛血清以補(bǔ)充蛋白質(zhì)、生長因子等營養(yǎng)成分，此外還需加入 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液，有效預(yù)防細(xì)菌污染。在日常培養(yǎng)過程中，需每 2-3 天更換一次新鮮培養(yǎng)基，及時(shí)清除細(xì)胞代謝產(chǎn)生的乳酸、氨等廢物，避免其對(duì)細(xì)胞活性產(chǎn)生抑制。當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80%-90% 時(shí)，需進(jìn)行傳代操作：首先用磷酸鹽緩沖液（PBS）清洗細(xì)胞 2-3 次，去除殘留血清；隨后加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液，在 37℃條件下孵育 2-3 分鐘，待細(xì)胞間隙增大、胞體收縮后，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化；最后將細(xì)胞懸液按 1:3-1:5 的比例接種至新的培養(yǎng)瓶中，確保細(xì)胞能夠持續(xù)穩(wěn)定生長。

在科研應(yīng)用領(lǐng)域，TM4 細(xì)胞憑借其獨(dú)特的功能特性，展現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用價(jià)值。在生殖生物學(xué)研究中，科研人員可利用該細(xì)胞系探究 Sertoli 細(xì)胞與生精細(xì)胞之間的相互作用機(jī)制，通過共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析 Sertoli 細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子對(duì)生精細(xì)胞分化的調(diào)控作用，為揭示精子發(fā)生的分子機(jī)制提供關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)依據(jù)。在內(nèi)分泌調(diào)節(jié)研究方面，TM4 細(xì)胞可用于研究促性xian激素（如 FSH、LH）及性激素（如睪酮）對(duì) Sertoli 細(xì)胞功能的影響，解析內(nèi)分泌信號(hào)通路在睪丸生殖功能調(diào)節(jié)中的作用，為男性生殖內(nèi)分泌紊亂相關(guān)疾病的研究提供模型支持。在毒理學(xué)評(píng)估中，該細(xì)胞系常被用于檢測(cè)環(huán)境污染物、藥物及化學(xué)物質(zhì)對(duì)生殖系統(tǒng)的毒性作用，通過檢測(cè)細(xì)胞活力、凋亡率及分泌功能的變化，評(píng)估外源物質(zhì)對(duì)男性生殖健康的潛在風(fēng)險(xiǎn)，為生殖毒性藥物的篩選與安全評(píng)估提供重要技術(shù)支撐。此外，在男性生殖疾病研究中，TM4 細(xì)胞還可用于模擬精索靜脈曲張、睪丸炎等疾病狀態(tài)下 Sertoli 細(xì)胞的功能異常，探究疾病發(fā)生的病理機(jī)制，為開發(fā)針對(duì)性的治療方案提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

綜上所述，TM4 正常小鼠睪丸 Sertoli 細(xì)胞憑借其穩(wěn)定的生物學(xué)特性、明確的培養(yǎng)要求及在生殖領(lǐng)域的多元應(yīng)用價(jià)值，已成為生殖生物學(xué)基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化研究中不ke或缺的實(shí)驗(yàn)工具，為推動(dòng)男性生殖健康領(lǐng)域的學(xué)科發(fā)展、疾病機(jī)制探究及藥物研發(fā)提供了有力支撐。