PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞

產(chǎn)品簡介：

PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞源自大鼠腫瘤，貼壁生長具長神經(jīng)突起，高表達(dá)神經(jīng)元標(biāo)志物且強(qiáng)分泌兒茶酚胺，適用于神經(jīng)發(fā)育、退行性疾病及神經(jīng)損傷研究。

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更新時(shí)間：2025-10-28

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細(xì)胞/細(xì)菌培養(yǎng)試劑

血清細(xì)胞株

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PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞

PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞是指經(jīng)特定因子誘導(dǎo)后，從 PC-12 未分化細(xì)胞轉(zhuǎn)型而來的貼壁生長細(xì)胞系。該狀態(tài)下細(xì)胞顯著丟失腫瘤特性，高度呈現(xiàn)神經(jīng)元樣結(jié)構(gòu)與功能，兼具腎上腺嗜鉻細(xì)胞的神經(jīng)內(nèi)分泌基礎(chǔ)與神經(jīng)元的信號傳遞潛能，成為神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)退行性疾病及神經(jīng)損傷修復(fù)研究的核心模型，也是驗(yàn)證神經(jīng)保護(hù)藥物活性的標(biāo)準(zhǔn)化工具。

一、核心生物學(xué)特性（高分化專屬特征）

（一）來源與功能定位

該細(xì)胞由 PC-12 未分化細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化而來，誘導(dǎo)過程通常以神經(jīng)生長因子（NGF）為核心信號，促使細(xì)胞啟動向交感神經(jīng)元樣細(xì)胞的分化程序。高分化狀態(tài)下，細(xì)胞雖保留腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤的起源屬性（如部分兒茶酚胺合成能力），但核心功能已轉(zhuǎn)向神經(jīng)元樣作用 —— 具備神經(jīng)突起形成、神經(jīng)遞質(zhì)分泌及突觸樣結(jié)構(gòu)構(gòu)建能力，可模擬神經(jīng)元的生長、信號傳遞與損傷反應(yīng)，填bu了原代神經(jīng)元培養(yǎng)周期長、穩(wěn)定性差的研究空白。

（二）形態(tài)與增殖特征

高分化狀態(tài)下，細(xì)胞形態(tài)與未分化狀態(tài)形成鮮明對比：呈不規(guī)則梭形，貼壁生長時(shí)分散分布（無未分化細(xì)胞的 “細(xì)胞團(tuán)" 特征），伸出大量細(xì)長神經(jīng)突起（長度可達(dá)細(xì)胞直徑的 5-10 倍），部分突起形成分支并相互連接，呈現(xiàn)典型的神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)形態(tài)；胞質(zhì)內(nèi)嗜堿性顆粒數(shù)量顯著增加（約 20-30 個(gè) / 細(xì)胞），顆粒體積增大且分布集中，是神經(jīng)遞質(zhì)儲存的核心結(jié)構(gòu)；細(xì)胞核呈橢圓形，核仁模糊，染色質(zhì)呈粗顆粒狀分布，異染色質(zhì)比例升高，符合分化細(xì)胞的核形態(tài)特征。

增殖能力大幅減弱，倍增時(shí)間延長至 120 小時(shí)以上，甚至停止增殖（與未分化細(xì)胞 48-72 小時(shí)的倍增時(shí)間形成顯著差異）；軟瓊脂克隆形成率 < 10%，幾乎喪失腫瘤細(xì)胞的錨定非依賴性生長能力，反映其腫瘤特性的顯著丟失。

（三）分子與功能特征

分子層面，高分化細(xì)胞的表型呈現(xiàn) “神經(jīng)元化" 特征，與未分化細(xì)胞差異顯著：

神經(jīng)元標(biāo)志物高表達(dá)：微管相關(guān)蛋白 MAP2、神經(jīng)絲蛋白 NF-200、突觸囊泡蛋白 SV2 等神經(jīng)元特異性標(biāo)志物表達(dá)量較未分化細(xì)胞提升 10-20 倍，通過免疫熒光可清晰觀察到神經(jīng)突起中的陽性信號，是判斷高分化狀態(tài)的核心指標(biāo)；

神經(jīng)內(nèi)分泌功能強(qiáng)化：神經(jīng)生長因子受體 TrkA、p75NTR 表達(dá)量為未分化細(xì)胞的 2.5-3 倍，且受體多定位于神經(jīng)突起末端，增強(qiáng)對神經(jīng)信號的響應(yīng)能力；兒茶酚胺合成通路核心酶（如多巴胺 β- 羥化酶 DBH）表達(dá)上調(diào)，分泌量達(dá) 3-5ng/10?細(xì)胞 / 24h，是未分化細(xì)胞的 3-5 倍，可通過高效液相色譜（HPLC）精準(zhǔn)定量；

腫瘤標(biāo)志物下調(diào)：嗜鉻粒蛋白 A（CgA）、突觸素（Synaptophysin）等腎上腺腫瘤相關(guān)標(biāo)志物表達(dá)量降至未分化細(xì)胞的 30%-40%，反映腫瘤特性的弱化。

功能上，高分化細(xì)胞展現(xiàn)典型神經(jīng)元響應(yīng)：對神經(jīng)毒性物質(zhì)（如 6 - 羥基多巴胺、淀粉樣蛋白 β）高度敏感，相同濃度處理下凋亡率是未分化細(xì)胞的 5-8 倍，且會出現(xiàn)神經(jīng)突起wei縮、突觸結(jié)構(gòu)破壞等損傷表現(xiàn)，可模擬神經(jīng)元損傷的病理過程；同時(shí)具備一定的信號傳遞能力，神經(jīng)遞質(zhì)釋放可被電刺激或化學(xué)信號調(diào)控，為神經(jīng)信號傳導(dǎo)機(jī)制研究提供可能。

二、體外培養(yǎng)與分化誘導(dǎo)條件

（一）分化誘導(dǎo)關(guān)鍵體系

從 PC-12 未分化細(xì)胞誘導(dǎo)至高分化狀態(tài)，需采用專用誘導(dǎo)體系：

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：選用 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 馬血清 + 1% 胎牛血清（低血清環(huán)境可抑制增殖、促進(jìn)分化，與未分化細(xì)胞的高血清培養(yǎng)形成對比）；

核心誘導(dǎo)因子：神經(jīng)生長因子（NGF），濃度控制在 50ng/mL（過低易導(dǎo)致分化不wan全，過高會增加細(xì)胞凋亡率），部分研究可聯(lián)合腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）提升分化效率；

輔助條件：培養(yǎng)皿需提前用多聚賴氨酸包被（增強(qiáng)細(xì)胞貼壁能力，避免神經(jīng)突起脫落），培養(yǎng)環(huán)境維持 37℃、5% CO?、95% 濕度，pH 7.2-7.4，滲透壓 280-320mOsm/kg。

誘導(dǎo)周期約 5-7 天，每日觀察神經(jīng)突起形成情況，當(dāng)神經(jīng)突起陽性細(xì)胞占比≥80%、突起長度≥細(xì)胞直徑 5 倍時(shí)，判定為高分化狀態(tài)，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

（二）高分化細(xì)胞維護(hù)操作

高分化細(xì)胞因增殖能力弱、神經(jīng)突起易損傷，維護(hù)需特別注意：

培養(yǎng)基更換：每 3-4 天更換一次新鮮分化培養(yǎng)基，更換時(shí)采用 “半量更換法"（保留一半舊培養(yǎng)基，加入一半新培養(yǎng)基），避免因子濃度驟變導(dǎo)致神經(jīng)突起wei縮；

操作禁忌：嚴(yán)禁劇烈晃動培養(yǎng)皿或吹打細(xì)胞，如需轉(zhuǎn)移細(xì)胞，需用低濃度解離液（含 0.01% EDTA）輕柔處理，且僅可在分化后 3-5 天內(nèi)進(jìn)行（超過 5 天神經(jīng)突起易斷裂）；

狀態(tài)監(jiān)控：每日通過顯微鏡觀察神經(jīng)突起完整性，每周通過免疫熒光檢測 MAP2 表達(dá)（確保高表達(dá)狀態(tài)），每兩周檢測兒茶酚胺分泌量，防止細(xì)胞出現(xiàn) “去分化" 現(xiàn)象（表現(xiàn)為神經(jīng)突起縮短、神經(jīng)元標(biāo)志物下調(diào)）。

（三）凍存與復(fù)蘇限制

高分化細(xì)胞因神經(jīng)突起脆弱，不建議常規(guī)凍存：凍存過程中冰晶易導(dǎo)致神經(jīng)突起斷裂，復(fù)蘇后細(xì)胞存活率通常 < 30%，且難以恢復(fù)高分化表型。若需短期保存，可將細(xì)胞置于 4℃環(huán)境中暫存（不超過 48 小時(shí)），期間停止更換培養(yǎng)基，恢復(fù)培養(yǎng)后需補(bǔ)充新鮮 NGF（50ng/mL），培養(yǎng) 24 小時(shí)后觀察神經(jīng)突起狀態(tài)，確認(rèn)無明顯損傷后再使用。

三、主要實(shí)驗(yàn)應(yīng)用場景（高分化專屬）

（一）神經(jīng)發(fā)育與分化機(jī)制研究

高分化細(xì)胞是解析神經(jīng)分化后期機(jī)制的理想模型：

神經(jīng)突起生長調(diào)控：通過檢測不同信號分子（如軸突導(dǎo)向因子 Netrin-1、Slit）對神經(jīng)突起長度、分支數(shù)量的影響，結(jié)合 Western blot 分析細(xì)胞骨架蛋白（如 Tubulin、Actin）的表達(dá)與磷酸化水平，探索神經(jīng)突起生長的分子機(jī)制；

突觸形成機(jī)制：利用高分化細(xì)胞可形成突觸樣結(jié)構(gòu)的特性，通過免疫熒光共定位檢測突觸前蛋白（Synapsin I）與突觸后蛋白（PSD-95）的分布，研究突觸形成過程中關(guān)鍵基因（如 neuroligin、neurexin）的調(diào)控作用，為神經(jīng)發(fā)育異常相關(guān)疾病研究提供依據(jù)。

（二）神經(jīng)退行性疾病模型構(gòu)建與藥物篩選

依托高分化細(xì)胞的神經(jīng)元樣特性，可構(gòu)建多種疾病體外模型并開展藥物篩選：

帕金森病模型：用 6 - 羥基多巴胺處理高分化細(xì)胞，誘導(dǎo)多巴胺能神經(jīng)元樣細(xì)胞損傷，檢測細(xì)胞凋亡率、兒茶酚胺分泌量及 TH 蛋白表達(dá)變化，篩選具有神經(jīng)保護(hù)作用的藥物（如抗氧化劑、多巴胺前體物質(zhì)）；

阿爾茨海默病模型：用淀粉樣蛋白 β（Aβ）或 tau 蛋白過度磷酸化誘導(dǎo)劑處理細(xì)胞，觀察神經(jīng)突起wei

分化狀態(tài)穩(wěn)定性控制：高分化細(xì)胞易出現(xiàn) “去分化"，培養(yǎng)過程中需維持 NGF 濃度穩(wěn)定（50ng/mL），避免血清濃度升高（不可超過 1% 馬血清 + 1% 胎牛血清），且培養(yǎng)時(shí)間不宜超過 10 天（超過后細(xì)胞易逐漸丟失分化表型），建議每周重新誘導(dǎo)分化一批細(xì)胞，確保實(shí)驗(yàn)材料的一致性。

損傷實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范：開展神經(jīng)毒性或損傷實(shí)驗(yàn)時(shí)，需設(shè)置 “未損傷高分化細(xì)胞" 作為空白對照，同時(shí)設(shè)置 “溶劑處理組"（如 6 - 羥基多巴胺的溶劑組），排除溶劑對細(xì)胞的非特異性影響；損傷誘導(dǎo)劑濃度需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定（選擇可導(dǎo)致 50%-60% 細(xì)胞損傷的濃度），避免濃度過高導(dǎo)致細(xì)胞大量死亡，或濃度過低無法達(dá)到損傷效果。

與未分化細(xì)胞的對比設(shè)計(jì)：若需研究 “分化狀態(tài)對細(xì)胞功能的影響"，需同步培養(yǎng) PC-12 未分化細(xì)胞作為對照，確保兩組細(xì)胞的培養(yǎng)環(huán)境（如血清批次、培養(yǎng)箱條件）一致，僅差異在于是否進(jìn)行分化誘導(dǎo)，通過對比明確高分化狀態(tài)的專屬功能及分子機(jī)制，避免單一細(xì)胞狀態(tài)實(shí)驗(yàn)導(dǎo)致結(jié)果片面。

上一個(gè)：人胚腎上皮細(xì)胞