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更新時(shí)間:2025-10-22
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021-34556080
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SF763人腦瘤細(xì)胞
SF763人腦瘤細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤研究領(lǐng)域的重要體外實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,其明確的臨床起源與穩(wěn)定的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤生物學(xué)特征,為解析腦腫瘤發(fā)病機(jī)制、開發(fā)抗腦瘤治療方案提供了關(guān)鍵載體。該細(xì)胞系源自人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織 —— 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤作為成人原發(fā)性腦腫瘤中惡性程度最高的類型(WHO IV 級(jí)),具有增殖迅速、侵襲性強(qiáng)、易復(fù)發(fā)且預(yù)后極差的特點(diǎn),臨床 5 年生存率不足 10%。SF763 細(xì)胞經(jīng)體外原代培養(yǎng)、傳代純化后建立,完整保留了原代膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的核心惡性屬性,如不受控的增殖能力、浸潤(rùn)性生長(zhǎng)傾向及對(duì)常規(guī)治療的耐藥潛力,能在體外精準(zhǔn)模擬膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的生長(zhǎng)與進(jìn)展過程,成為連接腦腫瘤基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的重要橋梁。
從生物學(xué)特性來看,SF763 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞形態(tài)與生長(zhǎng)特征,且具有一定異質(zhì)性。在光學(xué)顯微鏡下觀察,細(xì)胞主要表現(xiàn)為兩種形態(tài):上皮樣細(xì)胞呈多邊形,胞質(zhì)豐富,細(xì)胞核大而不規(guī)則,核仁清晰可見,部分細(xì)胞存在多核或巨核現(xiàn)象,體現(xiàn)惡性腫瘤細(xì)胞的核異型性;梭形細(xì)胞則呈長(zhǎng)梭狀,胞質(zhì)延伸形成細(xì)長(zhǎng)突起,類似神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)特征,兩種形態(tài)細(xì)胞?;旌仙L(zhǎng),排列松散且無明顯接觸抑制(這是惡性腫瘤細(xì)胞區(qū)別于正常細(xì)胞的關(guān)鍵特征之一),與臨床膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織中細(xì)胞的異質(zhì)性生長(zhǎng)模式高度契合。在生長(zhǎng)特性方面,SF763 細(xì)胞以貼壁方式生長(zhǎng),需依賴培養(yǎng)容器表面附著才能正常增殖,常規(guī)培養(yǎng)條件需維持在 37℃、5% CO?的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中,以保障細(xì)胞的代謝活性與分裂能力。其生長(zhǎng)速度處于中等偏快水平,倍增時(shí)間約為 48-60 小時(shí),即完成一次完整細(xì)胞周期需 2-2.5 天,培養(yǎng)過程中需密切監(jiān)測(cè)細(xì)胞密度,當(dāng)匯合度達(dá)到 70%-80% 時(shí)及時(shí)傳代,避免過度匯合導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變、生長(zhǎng)停滯或耐藥相關(guān)基因表達(dá)異常。
在培養(yǎng)操作與質(zhì)量控制層面,SF763 細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)條件有明確要求,需遵循規(guī)范操作以確保細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定與實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。培養(yǎng)基選擇上,常規(guī)使用含 10%-15% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基(比例通常為 1:1),血清需經(jīng)過嚴(yán)格篩選,保證無支原體污染且富含神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)因子(如表皮生長(zhǎng)因子 EGF、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 bFGF),這些因子對(duì)維持膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的增殖活性與侵襲特性至關(guān)重要;若需長(zhǎng)期培養(yǎng),可在培養(yǎng)基中添加適量廣譜抗菌試劑,有效預(yù)防細(xì)菌污染。傳代操作時(shí),首先用無菌 PBS 緩沖液輕柔沖洗細(xì)胞表面 2-3 次,徹di去除殘留的培養(yǎng)基與細(xì)胞代謝廢物(避免影響后續(xù)處理效果),隨后加入適量細(xì)胞消化試劑,置于 37℃培養(yǎng)箱中孵育 2-3 分鐘,期間需在顯微鏡下動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞狀態(tài),待上皮樣細(xì)胞間隙增大、梭形細(xì)胞突起回縮且細(xì)胞開始脫落時(shí),立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化(血清中的相關(guān)成分可快速阻斷消化反應(yīng),防止細(xì)胞損傷),用移液器輕柔吹打細(xì)胞(力度需適中,避免破壞細(xì)胞完整性),使其脫離培養(yǎng)表面并形成單細(xì)胞懸液,最后按 1:3-1:5 的比例將細(xì)胞接種至新的培養(yǎng)容器中,加入新鮮培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。質(zhì)量控制方面,需定期通過臺(tái)盼藍(lán)染色法檢測(cè)細(xì)胞活力,確?;盍S持在 85% 以上;通過 STR 分型鑒定確認(rèn)細(xì)胞身份,排除與其他腦瘤細(xì)胞系(如 U87、SF767 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)交叉污染的可能;通過 PCR 或熒光法支原體檢測(cè)試劑盒檢測(cè),確保細(xì)胞無支原體污染,避免因支原體感染干擾細(xì)胞生長(zhǎng)速度、基因表達(dá)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,SF763 細(xì)胞憑借其與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的高度生物學(xué)相似性,在多個(gè)研究方向中發(fā)揮核心作用。在發(fā)病機(jī)制研究中,科研人員利用該細(xì)胞系探索膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制,例如通過 CRISPR-Cas9 基因編輯技術(shù)敲除或過表達(dá)腦腫瘤關(guān)鍵基因(如 EGFR、PTEN、p53、MGMT),觀察細(xì)胞增殖、凋亡、遷移與侵襲能力的變化,明確目標(biāo)基因的功能 —— 如 EGFR 擴(kuò)增對(duì)細(xì)胞惡性增殖的驅(qū)動(dòng)作用,或 PTEN 缺失對(duì)細(xì)胞侵襲能力的增強(qiáng)效應(yīng);同時(shí)結(jié)合轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),分析細(xì)胞內(nèi)關(guān)鍵信號(hào)通路(如 PI3K/Akt/mTOR、MAPK/ERK、Notch 通路)的激活狀態(tài),構(gòu)建膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò),為尋找潛在治療靶點(diǎn)提供依據(jù)。在藥物研發(fā)方向,SF763 細(xì)胞是抗腦瘤藥物體外篩選的理想模型,科研人員將候選藥物(如靶向藥物 EGFR 抑制劑、中藥活性成分)作用于細(xì)胞后,通過 MTT 法、CCK-8 法檢測(cè)細(xì)胞活力,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,通過 Transwell 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移與侵襲能力,綜合評(píng)估藥物的抗腫瘤活性,為后續(xù)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)篩選候選藥物;此外,還可利用該細(xì)胞系研究藥物作用機(jī)制,如分析藥物對(duì) MGMT 基因表達(dá)的影響(MGMT 是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤對(duì)特定治療藥物耐藥的關(guān)鍵基因),明確藥物是否通過下調(diào) MGMT 增強(qiáng)治療敏感性。在耐藥模型構(gòu)建中,SF763 細(xì)胞可通過體外逐步遞增特定治療藥物濃度,誘導(dǎo)建立耐藥細(xì)胞株,用于研究膠質(zhì)母細(xì)胞瘤治療耐藥機(jī)制,篩選逆轉(zhuǎn)耐藥的藥物或聯(lián)合治療方案。
不過,使用 SF763 細(xì)胞開展研究時(shí)需注意其局限性。該細(xì)胞系源自單一患者的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織,無法wan全涵蓋不同分子亞型(如 IDH 突變型 / 野生型、1p/19q 共缺失狀態(tài))膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的分子特征與治療響應(yīng)差異,因此研究結(jié)果需結(jié)合其他膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系或臨床樣本綜合分析;同時(shí),體外培養(yǎng)環(huán)境缺乏人體腦部腫瘤微環(huán)境(如血腦屏障、免疫細(xì)胞浸潤(rùn)、缺氧環(huán)境),無法真實(shí)模擬藥物在體內(nèi)的作用過程,部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果需通過動(dòng)物模型(如裸鼠顱內(nèi)移植瘤模型)進(jìn)一步驗(yàn)證,才能更可靠地為臨床研究提供參考。
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