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更新時間:2025-10-22
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SF767人腦瘤細胞
SF767人腦瘤細胞是中樞神經系統(tǒng)腫瘤研究領域的重要體外模型,其明確的臨床來源與穩(wěn)定的膠質母細胞瘤生物學特征,為解析腦腫瘤發(fā)病機制、開發(fā)抗腦瘤治療方案提供了關鍵實驗載體。該細胞系源自人腦膠質母細胞瘤組織 —— 膠質母細胞瘤是成人最常見且惡性程度最高的原發(fā)性腦腫瘤(WHO IV 級),具有增殖快、侵襲性強、預后極差的特點,5 年生存率不足 10%。SF767 細胞經體外原代培養(yǎng)、傳代純化后建立,保留了原代膠質母細胞瘤細胞的核心生物學屬性,如高增殖活性、浸潤性生長潛能及對常規(guī)治療的耐藥傾向,能在體外模擬膠質母細胞瘤的生長與進展特征,因此成為連接腦腫瘤基礎研究與臨床轉化的重要工具。
從生物學特性來看,SF767 細胞呈現(xiàn)典型的膠質母細胞瘤細胞形態(tài)與生長特征。在光學顯微鏡下觀察,細胞形態(tài)具有一定異質性,主要呈上皮樣或梭形:上皮樣細胞多為多邊形,胞質豐富,細胞核大而不規(guī)則,核仁明顯,部分細胞可見多核或巨核現(xiàn)象;梭形細胞則呈長梭狀,胞質延伸形成細長突起,類似神經膠質細胞的形態(tài)特征。兩種形態(tài)細胞?;旌仙L,排列松散且無明顯接觸抑制(惡性腫瘤細胞的典型特征),與臨床膠質母細胞瘤組織中細胞的異質性生長模式高度契合。在生長特性方面,該細胞以貼壁方式生長,需依賴培養(yǎng)容器表面附著增殖,常規(guī)培養(yǎng)條件需維持在 37℃、5% CO?的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中,以保障細胞的代謝活性與分裂能力。其生長速度處于中等偏快水平,倍增時間約為 48-60 小時,即完成一次完整細胞周期需 2-2.5 天,培養(yǎng)過程中需密切觀察細胞密度,當匯合度達到 70%-80% 時及時傳代,避免過度匯合導致細胞形態(tài)改變、生長停滯或出現(xiàn)耐藥性相關基因表達波動。
在培養(yǎng)操作與質量控制層面,SF767 細胞對培養(yǎng)條件有明確要求,以確保細胞狀態(tài)穩(wěn)定與實驗結果可靠。常規(guī)選用含 10%-15% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基(比例通常為 1:1),血清需經過嚴格篩選,保證無支原體污染且富含神經細胞生長所需的營養(yǎng)因子(如 EGF、bFGF),這些因子對維持膠質母細胞瘤細胞的增殖與侵襲特性至關重要;若需長期培養(yǎng),可在培養(yǎng)基中添加適量廣譜抗菌試劑(如雙抗),預防細菌污染。傳代操作時,首先用無菌 PBS 緩沖液輕柔沖洗細胞表面 2-3 次,徹di去除殘留的培養(yǎng)基與細胞代謝廢物(避免影響后續(xù)消化效果),隨后加入適量細胞消化試劑(如 0.25% 胰dan白酶 - EDTA),置于 37℃培養(yǎng)箱中孵育 2-3 分鐘,期間需在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),待上皮樣細胞間隙增大、梭形細胞突起回縮且細胞開始脫落時,立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化(血清中的胰dan白酶抑制劑可快速抑制消化反應,避免細胞損傷),用移液器輕柔吹打細胞(力度需適中,防止破壞細胞完整性),使其脫離培養(yǎng)表面并形成單細胞懸液,最后按 1:3-1:5 的比例將細胞接種至新的培養(yǎng)容器中,加入新鮮培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。質量控制方面,需定期通過細胞形態(tài)觀察、生長曲線繪制評估細胞活性,確保細胞生長狀態(tài)穩(wěn)定;通過 STR 分型鑒定確認細胞身份,排除與其他腦瘤細胞系(如 U87、U251 膠質母細胞瘤細胞)交叉污染的可能;通過支原體檢測試劑盒(如 PCR 法、熒光法)檢測,確保細胞無支原體污染,避免因支原體感染影響細胞生長速度、基因表達及實驗結果準確性。
在科研應用領域,SF767 細胞憑借其與膠質母細胞瘤的高度關聯(lián)性,在多個研究方向中發(fā)揮核心作用。在發(fā)病機制研究中,科研人員利用該細胞系探索膠質母細胞瘤的發(fā)生發(fā)展機制,例如通過基因編輯技術(如 CRISPR-Cas9)敲除或過表達腦腫瘤相關關鍵基因(如 EGFR、PTEN、p53、MGMT 等),觀察細胞增殖、凋亡、遷移與侵襲能力的變化,進而明確目標基因在膠質母細胞瘤進展中的功能 —— 如 EGFR 過表達對細胞惡性增殖的促進作用,或 PTEN 缺失對細胞侵襲能力的增強效應;同時可結合轉錄組學、蛋白質組學或代謝組學技術,分析細胞內關鍵信號通路(如 PI3K/Akt/mTOR、MAPK/ERK、Notch 通路)的激活狀態(tài),揭示膠質母細胞瘤的分子調控網絡,為尋找潛在治療靶點提供依據。在藥物研發(fā)方向,SF767 細胞是抗腦瘤藥物體外篩選的常用模型,科研人員將候選藥物(如hua療藥物替mo唑胺、靶向藥物 EGFR 抑制劑、中藥活性成分或新型小分子化合物)作用于細胞后,通過 MTT 法、CCK-8 法檢測細胞活力,通過流式細胞術檢測細胞凋亡率,通過 Transwell 實驗或劃痕實驗檢測細胞遷移與侵襲能力,綜合評估藥物的抗腫瘤活性,為后續(xù)體內實驗篩選出具有潛力的候選藥物;此外,該細胞系還可用于藥物作用機制研究,例如分析藥物對 MGMT 基因表達的影響(MGMT 是膠質母細胞瘤對替mo唑胺耐藥的關鍵基因),明確藥物是否通過下調 MGMT 增強hua療敏感性。在耐藥模型構建與研究中,SF767 細胞也是重要基礎 —— 通過體外逐步遞增hua療藥物(如替mo唑胺)濃度,可誘導建立耐藥細胞株(如 SF767/TMZ 耐藥株),用于研究膠質母細胞瘤hua療耐藥的形成機制(如 MGMT 過表達、DNA 損傷修復能力增強),并篩選能逆轉耐藥的藥物或聯(lián)合治療方案。
不過,在使用 SF767 細胞開展研究時,也需注意其局限性。該細胞系源自單一患者的膠質母細胞瘤組織,無法wan全涵蓋不同分子亞型(如 IDH 突變型 / 野生型、1p/19q 共缺失狀態(tài)、EGFR 擴增與否)膠質母細胞瘤的分子特征與生物學行為,而不同亞型的膠質母細胞瘤對治療的響應差異顯著,因此研究結果需結合其他膠質母細胞瘤細胞系或臨床樣本數據進行綜合分析,以確保結論的普適性。同時,體外培養(yǎng)環(huán)境與人體腦部腫瘤微環(huán)境(如血腦屏障、神經膠質細胞相互作用、免疫細胞浸潤、缺氧微環(huán)境等)存在顯著差異,SF767 細胞在體外的生長狀態(tài)、對藥物的敏感性可能與體內膠質母細胞瘤細胞不同 —— 例如體外培養(yǎng)缺乏血腦屏障影響,無法真實模擬藥物進入腦部發(fā)揮作用的過程,部分實驗結果需通過動物模型(如裸鼠顱內移植瘤模型)進一步驗證,才能更可靠地為臨床研究提供參考。
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