QSG-7701人肝細胞

QSG-7701人肝細胞是源自正常人類肝組織的貼壁生長細胞系，因保留肝細胞的核心生理功能（如物質(zhì)代謝、解毒、蛋白合成），且體外培養(yǎng)穩(wěn)定性高，成為研究肝臟生理病理機制、藥物代謝與肝毒性評估的經(jīng)典體外模型，為肝病研究、藥物研發(fā)及臨床轉(zhuǎn)化提供關鍵實驗支撐。

一、核心生物學特性

細胞來源上，QSG-7701 細胞分離自健康人肝臟組織，經(jīng)體外培養(yǎng)建系后，持續(xù)保留正常肝細胞的形態(tài)與功能特征，無腫瘤細胞的惡性增殖特性，是模擬體內(nèi)正常肝臟生理狀態(tài)的理想細胞模型。形態(tài)上，QSG-7701 細胞呈多邊形或梭形，貼壁生長時呈 “鋪路石" 樣排列，細胞間連接緊密，胞質(zhì)豐富且含有大量線粒體（參與能量代謝）與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（參與蛋白合成），細胞核大而圓，核仁清晰，符合正常肝細胞的典型形態(tài)特征。

功能特性方面，QSG-7701 細胞具備正常肝細胞的核心生理功能：可高效合成白蛋白、尿素等肝細胞特異性產(chǎn)物，其合成能力與體內(nèi)正常肝細胞接近，可用于評估肝臟合成功能；表達多種藥物代謝酶，如細胞色素 P450 酶系（CYP450，如 CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4），能模擬體內(nèi)藥物的 Ⅰ 相代謝過程，為藥物代謝研究提供關鍵工具；同時具有一定的解毒功能，可清除體內(nèi)代謝廢物與外源毒性物質(zhì)，且對肝損傷誘導劑（如 CCl?、D - 氨基半乳糖）敏感，能模擬肝損傷病理過程，為肝病機制研究提供模型基礎。此外，細胞基因組穩(wěn)定性優(yōu)異，傳代過程中染色體數(shù)目與結(jié)構(gòu)不易變異，確保實驗結(jié)果的可重復性。

二、體外培養(yǎng)關鍵條件

基礎培養(yǎng)基選擇以 RPMI-1640 或 DMEM（高糖）為主，需添加 10%-15% 胎牛血清（需篩選批次，確保含肝細胞生長必需的激素、生長因子），滿足細胞對營養(yǎng)物質(zhì)的需求，同時加入 1% 無菌防護試劑預防細菌污染。為維持肝細胞功能，可額外添加 20μg/mL 胰島素，促進細胞合成代謝與功能維持；培養(yǎng)基 pH 需控制在 7.2-7.4，滲透壓維持在 280-320mOsm/kg，可通過添加 HEPES 緩沖液（終濃度 10mM）增強 pH 穩(wěn)定性，避免環(huán)境波動影響細胞活性。

培養(yǎng)環(huán)境需嚴格控制為 37℃、5% CO?的恒溫恒濕條件，培養(yǎng)箱內(nèi)濕度保持在 95% 以上，防止培養(yǎng)基因水分蒸發(fā)導致滲透壓升高。因細胞貼壁生長，傳代時需先用消化液處理（37℃孵育 1-2 分鐘），待細胞間隙增大、形態(tài)變圓后，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打制成單細胞懸液，按 1:3-1:5 的比例接種至新培養(yǎng)瓶，傳代周期約 3-4 天，需在細胞匯合度達到 80%-90% 時進行傳代，避免細胞過度密集導致接觸抑制，影響功能表達。

細胞維護過程中，每日需通過倒置顯微鏡觀察細胞狀態(tài)：若發(fā)現(xiàn)細胞形態(tài)變圓、脫壁增多，或培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁、顏色變黃（pH 下降），需及時更換培養(yǎng)基或排查污染；若細胞生長緩慢，可檢測血清中生長因子含量或調(diào)整胰島素濃度，維持細胞活性。細胞凍存時，需使用含 10% 二甲基亞砜（DMSO）的胎牛血清作為凍存液，采用梯度降溫法（4℃ 30 分鐘→-20℃ 1 小時→-80℃過夜→轉(zhuǎn)入液氮保存），減少冰晶形成對細胞的損傷，復蘇時需快速解凍并立即加入培養(yǎng)基稀釋，提高復蘇存活率。

三、主要實驗應用場景

在肝臟生理病理機制研究中，QSG-7701 細胞是核心模型。科研人員可通過構(gòu)建肝損傷模型（如 CCl?誘導），觀察細胞形態(tài)變化、肝功能指標（白蛋白合成、尿素生成）及炎癥因子（IL-6、TNF-α）表達變化，解析肝損傷的分子機制；也可通過干擾肝臟相關基因（如 HNF4α、CYP3A4），研究基因?qū)Ω渭毎δ艿恼{(diào)控作用，為理解肝臟生理功能與疾病發(fā)生機制提供理論支撐。

藥物代謝與肝毒性評估領域，QSG-7701 細胞應用廣泛?？衫眉毎磉_的 CYP450 酶系，研究藥物在體外的代謝途徑與代謝產(chǎn)物，明確藥物代謝關鍵酶，為藥物劑型優(yōu)化與藥物相互作用研究提供數(shù)據(jù)；同時，通過將不同濃度的藥物作用于細胞，檢測細胞活力、肝功能指標及凋亡率，評估藥物對肝臟的潛在毒性，篩選低肝毒性藥物，為藥物研發(fā)的安全性評價提供關鍵依據(jù)。

在肝病治療研究中，QSG-7701 細胞可用于治療藥物的效果驗證。將保肝藥物（如甘草酸制劑）作用于肝損傷模型細胞，觀察細胞功能恢復情況（如白蛋白合成增加、炎癥因子下降），評估藥物的保肝效果；也可用于干細胞或基因治療的初步研究，如將間充質(zhì)干細胞分泌的外泌體作用于受損 QSG-7701 細胞，觀察其對細胞修復的促進作用，為肝病治療新策略提供實驗基礎。

四、實驗應用注意事項

實驗前需通過 Western blot 或 ELISA 驗證細胞功能標志物（如白蛋白、CYP3A4）的表達水平，確保細胞功能穩(wěn)定，避免因傳代次數(shù)過多（建議傳代不超過 20 代）導致功能退化，影響實驗結(jié)果的可靠性；不同批次胎牛血清對細胞功能影響較大，需通過預實驗篩選能維持細胞 CYP450 酶活性與白蛋白合成能力的血清批次，固定使用以保證實驗一致性。

貼壁細胞消化過程需嚴格控制消化時間，避免消化過度導致細胞損傷或消化不充分影響傳代效率，建議在顯微鏡下實時觀察細胞狀態(tài)，待細胞邊緣收縮、間隙增大時立即終止消化。操作時需嚴格無菌，QSG-7701 細胞對污染敏感，尤其是真菌污染易導致細胞功能異常，每傳代 3 次需通過 PCR 法檢測支原體，若發(fā)現(xiàn)污染需立即丟棄，防止交叉感染。

結(jié)果解讀需結(jié)合體內(nèi)生理環(huán)境，QSG-7701 細胞雖保留肝細胞核心功能，但體外培養(yǎng)條件無法模擬體內(nèi)肝臟的微環(huán)境（如細胞間相互作用、血流動力學），藥物代謝效率與肝毒性反應可能與體內(nèi)存在差異，實驗結(jié)論需結(jié)合動物實驗或臨床數(shù)據(jù)綜合分析；同時，需注意細胞與腫瘤肝細胞系（如 HepG2）的差異，QSG-7701 細胞無惡性特征，更適用于正常肝臟生理與非腫瘤性肝病研究，不可替代腫瘤細胞系用于肝癌相關實驗。