SAC-ⅡC3小鼠腹水瘤細(xì)胞

SAC-ⅡC3小鼠腹水瘤細(xì)胞是腫瘤生物學(xué)研究與藥物研發(fā)領(lǐng)域常用的小鼠腹水源性腫瘤模型，其獨(dú)特的懸浮生長(zhǎng)特性、強(qiáng)增殖能力及典型的惡性腫瘤屬性，為解析腹水瘤發(fā)病機(jī)制、評(píng)估藥物抗腫瘤活性及探索腫瘤微環(huán)境相互作用提供了關(guān)鍵工具。該細(xì)胞系源自小鼠腹水瘤組織，通過(guò)體外分離純化建立 —— 腹水瘤是一類(lèi)能在動(dòng)物腹腔內(nèi)形成腹水并大量增殖的惡性腫瘤，其細(xì)胞脫離實(shí)體瘤組織后，可在腹腔液中懸浮生長(zhǎng)，兼具實(shí)體瘤的惡性特征與懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)。SAC-ⅡC3 細(xì)胞經(jīng)多次傳代篩選后，保留了原代腹水瘤細(xì)胞的核心生物學(xué)屬性，既能穩(wěn)定懸浮增殖，又能在體內(nèi)形成腹水瘤模型，成為連接體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)與體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的重要橋梁。

從生物學(xué)特性來(lái)看，SAC-ⅡC3 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的腹水瘤細(xì)胞形態(tài)與生長(zhǎng)特征。在光學(xué)顯微鏡下觀察，細(xì)胞呈圓形或橢圓形，直徑約 10-15μm，胞質(zhì)均勻透明，細(xì)胞核大而圓形，核仁清晰可見(jiàn)，部分細(xì)胞存在雙核或多核現(xiàn)象，體現(xiàn)惡性腫瘤細(xì)胞的核異型性；細(xì)胞無(wú)明顯貼壁需求，可在培養(yǎng)基中自由懸浮生長(zhǎng)，且生長(zhǎng)過(guò)程中不易聚集成團(tuán)（或僅形成松散小團(tuán)），便于后續(xù)細(xì)胞計(jì)數(shù)、藥物處理及分子檢測(cè)。在生長(zhǎng)特性方面，該細(xì)胞的最適培養(yǎng)溫度為 37℃，需在含 5% CO?的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中維持 pH 穩(wěn)定，其增殖能力突出，倍增時(shí)間約為 24-36 小時(shí)，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞密度可達(dá)到 1×10?-2×10?個(gè) /mL，且細(xì)胞活力能長(zhǎng)期維持在 90% 以上；與貼壁細(xì)胞相比，懸浮生長(zhǎng)的特性使其無(wú)需依賴(lài)培養(yǎng)容器表面黏附，可通過(guò)搖瓶或生物反應(yīng)器實(shí)現(xiàn)大規(guī)模培養(yǎng)，為批量制備實(shí)驗(yàn)樣本或藥物篩選提供便利。此外，SAC-ⅡC3 細(xì)胞還保留了腹水瘤的體內(nèi)成瘤能力 —— 將其接種至同源小鼠腹腔后，可快速誘導(dǎo)形成腹水，且腹水內(nèi)富含腫瘤細(xì)胞，便于獲取大量原代腹水瘤細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)，這一特性使其成為體內(nèi)外聯(lián)合研究的理想模型。

在培養(yǎng)操作與質(zhì)量控制層面，SAC-ⅡC3 細(xì)胞的培養(yǎng)體系與貼壁細(xì)胞差異顯著，需遵循專(zhuān)屬規(guī)范以確保細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定。培養(yǎng)基選擇上，常規(guī)使用含 10%-15% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基（或 DMEM/F12 培養(yǎng)基），血清需經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選，保證無(wú)支原體污染且富含細(xì)胞生長(zhǎng)所需的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)因子（如 IL-6、EGF）—— 這些因子不僅能促進(jìn)細(xì)胞懸浮增殖，還能維持其惡性表型與體內(nèi)成瘤能力；若需長(zhǎng)期培養(yǎng)，可在培養(yǎng)基中添加適量抗生素（如青mei素 - 鏈mei素混合液），預(yù)防細(xì)菌污染，但需注意抗生素濃度不宜過(guò)高，避免影響細(xì)胞活力。培養(yǎng)操作時(shí)，懸浮細(xì)胞需采用搖瓶培養(yǎng)體系，搖床轉(zhuǎn)速控制在 80-100rpm，確保細(xì)胞均勻懸浮且獲得充足氧氣；換液時(shí)無(wú)需消化處理，直接收集細(xì)胞懸液，經(jīng)低速離心（1000-1500rpm，5 分鐘）后去除舊培養(yǎng)基，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞即可，操作流程較貼壁細(xì)胞更簡(jiǎn)便。傳代時(shí)，按 1:3-1:5 的比例將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞接種至新?lián)u瓶中，補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基至適宜體積，繼續(xù)培養(yǎng) 24-48 小時(shí)即可進(jìn)入下一個(gè)生長(zhǎng)周期。質(zhì)量控制方面，需定期通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)染色法檢測(cè)細(xì)胞活力，確?；盍S持在 85% 以上；通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察確認(rèn)細(xì)胞無(wú)異常變形（如胞體腫脹、核固縮），排除凋亡或污染跡象；若用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，還需通過(guò)小鼠腹腔接種驗(yàn)證其成瘤能力（通常接種后 7-10 天可形成明顯腹水），通過(guò) STR 分型鑒定確認(rèn)細(xì)胞身份，避免與其他小鼠腹水瘤細(xì)胞系（如 S180 細(xì)胞）交叉污染。

在科研應(yīng)用領(lǐng)域，SAC-ⅡC3 細(xì)胞憑借其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，在多個(gè)研究方向中發(fā)揮核心作用。在腫瘤生物學(xué)研究中，它是腹水瘤發(fā)病機(jī)制探索的理想模型 —— 科研人員可利用其研究腹水形成機(jī)制（如腫瘤細(xì)胞分泌的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 VEGF 對(duì)腹腔血管通透性的影響）、腫瘤細(xì)胞代謝特征（如糖酵解增強(qiáng)的 Warburg 效應(yīng)），或通過(guò)基因編輯技術(shù)（如 CRISPR-Cas9）敲除關(guān)鍵基因（如 p53、Myc），觀察細(xì)胞增殖、凋亡及體內(nèi)成瘤能力變化，明確基因在腹水瘤進(jìn)展中的功能。在藥物研發(fā)方向，SAC-ⅡC3 細(xì)胞是抗腫瘤藥物體外篩選與活性評(píng)價(jià)的重要工具 —— 科研人員將候選藥物（如hua療藥物、靶向藥物、中藥活性成分）與細(xì)胞共培養(yǎng)后，通過(guò) MTT 法、CCK-8 法檢測(cè)細(xì)胞活力，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞增殖潛能的影響，快速篩選出具有抗腫瘤活性的化合物；同時(shí)，結(jié)合體內(nèi)腹水瘤模型，可進(jìn)一步驗(yàn)證藥物在動(dòng)物體內(nèi)的療效（如檢測(cè)藥物對(duì)腹水生成量、腫瘤細(xì)胞數(shù)量的抑制作用），為藥物研發(fā)提供體內(nèi)外雙重?cái)?shù)據(jù)支撐。在腫瘤免疫研究中，SAC-ⅡC3 細(xì)胞可用于探索腫瘤微環(huán)境與免疫細(xì)胞的相互作用 —— 腹腔腹水不僅富含腫瘤細(xì)胞，還含有大量免疫細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞、T 細(xì)胞），科研人員可分離腹水中的免疫細(xì)胞，研究其對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷活性，或評(píng)估免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如 PD-1 抗體）對(duì)腹水瘤的治療效果，為免yi治療策略研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。此外，該細(xì)胞還可用于腫瘤標(biāo)志物篩選，通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)或轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)分析細(xì)胞分泌的蛋白或基因表達(dá)譜，尋找腹水瘤早期診斷或預(yù)后評(píng)估的潛在標(biāo)志物。

不過(guò)，使用 SAC-ⅡC3 細(xì)胞開(kāi)展研究時(shí)需注意其局限性。該細(xì)胞系源自小鼠，其基因背景與人類(lèi)腹水瘤（如卵巢癌腹腔轉(zhuǎn)移形成的腹水）存在差異，因此在研究人類(lèi)腹水瘤相關(guān)機(jī)制或篩選人類(lèi)抗腫瘤藥物時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果需謹(jǐn)慎外推，通常需搭配人類(lèi)腹水瘤細(xì)胞系（如 SKOV3 細(xì)胞）進(jìn)行對(duì)比驗(yàn)證。此外，體外懸浮培養(yǎng)環(huán)境缺乏體內(nèi)腹腔微環(huán)境的復(fù)雜性（如腹腔間質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)、免疫抑制微環(huán)境），可能導(dǎo)致細(xì)胞的生物學(xué)行為與體內(nèi)狀態(tài)存在偏差，例如體外培養(yǎng)的細(xì)胞可能丟失部分與腹腔定植相關(guān)的基因表達(dá)，影響體內(nèi)成瘤效率。同時(shí)，長(zhǎng)期傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)遺傳漂變，如染色體數(shù)目異?；蚧蛲蛔儯虼诵瓒ㄆ趦龃嬖缙趥鞔?xì)胞，確保實(shí)驗(yàn)過(guò)程中細(xì)胞遺傳背景穩(wěn)定。